AMNGENT CONSUMABLES?
在生命科學領(lǐng)域的研究中,離心是一種必不可少的技術(shù)手段,更是實驗室中最常見的實驗項目。實驗室的小伙伴們經(jīng)常會問,各家離心管的標記的離心單位不一樣,這該如何區(qū)分比較呢?
離心技術(shù)的原理是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時產(chǎn)生強大的離心力,使置于旋轉(zhuǎn)體中的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮,從而使某些顆粒達到濃縮或與其他顆粒分離之目的。
有些生物顆粒可以在重力場(1×g)作用下實現(xiàn)分離,如人血細胞,將處理過的血細胞置于桌上1-2 小時,由于不同細胞的大小不一樣,白細胞和紅細胞能自動分層。但若需分離更小的生物顆粒,需要遠大于重力的力,通常我們稱這個力為離心力,我們可以通過沿軸旋轉(zhuǎn)裝有懸浮顆粒的離心管來實現(xiàn)用離心技術(shù)分離不同顆粒。利用離心機使離心管旋轉(zhuǎn),裝載了離心管并帶動離心管沿軸旋轉(zhuǎn)的是轉(zhuǎn)頭,顆粒在放射狀的離心力下從軸心向外運動。不管是細胞還是生物大分子受到離心力都可以用以下公式計算:
(1)
F離心力:顆粒受到的離心力;
m:顆粒的質(zhì)量;
ω:角速度;
r:離心半徑,即旋轉(zhuǎn)軸到顆粒的距離。
通常情況下,旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)頭受到的放射狀的力都是由相對離心力(RCF:Relative centrifugation force)來衡量的。而所謂的相對離心力即是離心力與重力之比,用以下公式表示:
(2)
RCF:相對離心力;
F離心力:顆粒受到的離心力;
F重力:顆粒受到的重力;
m:顆粒的質(zhì)量;
ω:角速度;
g:重力加速度;
r:離心半徑,即旋轉(zhuǎn)軸到顆粒的距離。
ω 是轉(zhuǎn)頭的角速度,指轉(zhuǎn)頭每秒鐘轉(zhuǎn)過的弧度數(shù),其值就是:
(3)ω=2πRPM/60=0.10472RPM
RPM:轉(zhuǎn)頭每分鐘轉(zhuǎn)過的轉(zhuǎn)數(shù)。
結(jié)合公式(2)和公式(3)可得到同一轉(zhuǎn)頭的轉(zhuǎn)速與相對離心力之間的關(guān)系:
(4)
r:離心半徑,即旋轉(zhuǎn)軸到顆粒的距離(單位:mm)。
離心管在離心機中離心的過程中,管口至管底的各點與旋轉(zhuǎn)軸之間的距離(離心半徑)是不一樣的,在計算中采用平均半徑作為離心半徑:r=(r min+r max)/2。
由上可以看出轉(zhuǎn)頭的相對離心力與轉(zhuǎn)頭的轉(zhuǎn)速的平方成正比,而且與轉(zhuǎn)頭的半徑成正比。對于同一轉(zhuǎn)頭而言,由于半徑不變,增加轉(zhuǎn)速也就相當于提高了相對離心力。
以安進特的離心管為例,安進特15ml離心管的離心力是9400G,當離心半徑為8cm即80mm時,代入公式(4),
RPM2=(9400x10002)/(1.12x80)
開方后得出轉(zhuǎn)速約為10000rpm。同理,已知轉(zhuǎn)速為15000rpm,離心半徑為8cm時,代入公式(4)
RCF=1.12x80x(15000/1000)2
我們可以計算得出相對離心力約為20000g。
由于安進特的內(nèi)部測試標準是15ml離心管的測試值達到11000g以此來保證各種使用條件下9400g的相對離心力,而安進特50ml離心管達到8400g使用的測試標準是10000g,因此使用安進特15ml離心管做實驗時想要滿足9400g相對離心力的需求時也可以放心大膽地使用該管哦!
圖片來源 l 安進特
策劃制作 l 呂莊周